四种医院制剂微生物限度检查法验证试验(1)
[摘要] 目的 建立四种医院制剂的微生物限度检查方法。 方法 按照《中国药典》2010年版一部附录微生物限度检查法进行试验，对四种医院制剂进行了微生物限度检查方法的验证。 结果 通过试验建立了四种医院制剂的微生物限度检查方法。 结论 复方大承气口服液、防风解毒口服液可采用常规法，呋柳擦剂、复方土荆皮酊可采用薄膜过滤法检查微生物限度。
[关键词] 医院制剂；抑菌作用；微生物限度检查；方法验证
[中图分类号] R95 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2015)19-51-03
[Abstract] Objective To establish microbial limit test of 4 hospital preparations. Methods 4 hospital preparations was received microbial limit test according to microbial limit test in appendix I of 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia. Results Microbial limit test of 4 hospital preparations was established by experiment. Conclusion Compound Dachengqi Oral and Detoxification Oral can adopt routine methods to test microbial limit.Fu Liu liniment and Compound tincture pseudolaric can adopt membrane filtration method to test microbial limit.
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[Key words] Hospital preparations；Bacteriostasis；Microbial limit test；Verification test
四种医院制剂均为含多种成分的复方制剂，处方组成比较复杂，其中呋柳擦剂与复方土荆皮酊处方中均含有水杨酸、苯甲酸成分，具有抗表皮真菌、止痒作用，用于手癣、脚癣、体癣等各种皮肤癣症。由处方和功效可知，这两种制剂具有一定的抑菌作用，含抑菌成分的医院制剂的微生物限度检查，必须先消除供试液的抑菌活性，然后再根据中国药典规定的方法进行检查[1-3]。复方大承气口服液是由大黄、芒硝、赤芍、桃仁、莱菔子、厚朴丝等药材组成，具有化瘀行气、通里攻下的作用，用于治疗各型肠梗阻。防风解毒口服液主要由白芷、防风、荆芥、紫苏叶、桂枝、桔梗等药材经加工而成，具有发散风寒、辛温解表的作用。医院制剂没有规定具体的微生物限度检查方法，根据国家药典委员会的要求，按照《中国药典》2010年版一部附录微生物限度检查法，分别对四种医院制剂进行了方法的验证，为规范医院制剂的微生物限度检查方法，提供了科学的依据。通过验证，复方大承气口服液、防风解毒口服液可用常规法进行微生物限度检查。呋柳擦剂与复方土荆皮酊细菌计数采用薄膜过滤法检查，霉菌和酵母菌计数采用常规法检查。
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1 资料与方法
1.1 仪器
HTY-2000 集菌仪(杭州泰林医疗器械厂)；GH-6000隔水式培养箱(天津泰斯特仪器有限公司)；LRH-250-MS霉菌培养箱(韶关泰宏医疗器械有限公司)；DF3-3红外线高温干燥箱(北京兴争仪器设备厂)；LDZX立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)。
1.2 菌种
大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B)44102]、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[CMCC(B)63501]、金黄色葡萄球菌(Staphy lococcus aureus)[CMCC(B)26003]、白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001]、黑曲霉(Aspergillus niger)[CMCC(F)98003]均购于中国药品生物制品检定所。
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1.3 培养基及试药
营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、营养肉汤、改良马丁、改良马丁琼脂、胆盐乳糖、pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液(批号分别为131218、1312192、131016、1309122、120113、140110、140124)均购自中国药品生物制品检定所。
1.4 样品
呋柳擦剂(北京军区北戴河疗养院，批号：20120917)、复方大承气口服液(解放军第261医院，批号：121022)、复方土荆皮酊(解放军白求恩国际和平医院，批号：20120524)、防风解毒口服液(解放军第261医院，批号：121105)。
2 方法
按照《中国药典》2010 年版一部[4]附录XⅢ C 微生物限度检查法进行验证试验。
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2.1 菌液的制备
(1)取经37℃培养18～24h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物1mL， 用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
(2)取经25～28℃培养18～24h的白色念珠菌的改良马丁液体培养物1mL，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
(3)取经25～28℃培养5～7d的黑曲霉改良马丁琼脂斜面培养物，加入3～5mL 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，吸出孢子悬液，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。, 百拇医药(杨静 李晓翠 徐轶飞)
[关键词] 医院制剂；抑菌作用；微生物限度检查；方法验证
[中图分类号] R95 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2015)19-51-03
[Abstract] Objective To establish microbial limit test of 4 hospital preparations. Methods 4 hospital preparations was received microbial limit test according to microbial limit test in appendix I of 2010 edition of Chinese Pharmacopoeia. Results Microbial limit test of 4 hospital preparations was established by experiment. Conclusion Compound Dachengqi Oral and Detoxification Oral can adopt routine methods to test microbial limit.Fu Liu liniment and Compound tincture pseudolaric can adopt membrane filtration method to test microbial limit.
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[Key words] Hospital preparations；Bacteriostasis；Microbial limit test；Verification test
四种医院制剂均为含多种成分的复方制剂，处方组成比较复杂，其中呋柳擦剂与复方土荆皮酊处方中均含有水杨酸、苯甲酸成分，具有抗表皮真菌、止痒作用，用于手癣、脚癣、体癣等各种皮肤癣症。由处方和功效可知，这两种制剂具有一定的抑菌作用，含抑菌成分的医院制剂的微生物限度检查，必须先消除供试液的抑菌活性，然后再根据中国药典规定的方法进行检查[1-3]。复方大承气口服液是由大黄、芒硝、赤芍、桃仁、莱菔子、厚朴丝等药材组成，具有化瘀行气、通里攻下的作用，用于治疗各型肠梗阻。防风解毒口服液主要由白芷、防风、荆芥、紫苏叶、桂枝、桔梗等药材经加工而成，具有发散风寒、辛温解表的作用。医院制剂没有规定具体的微生物限度检查方法，根据国家药典委员会的要求，按照《中国药典》2010年版一部附录微生物限度检查法，分别对四种医院制剂进行了方法的验证，为规范医院制剂的微生物限度检查方法，提供了科学的依据。通过验证，复方大承气口服液、防风解毒口服液可用常规法进行微生物限度检查。呋柳擦剂与复方土荆皮酊细菌计数采用薄膜过滤法检查，霉菌和酵母菌计数采用常规法检查。
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1 资料与方法
1.1 仪器
HTY-2000 集菌仪(杭州泰林医疗器械厂)；GH-6000隔水式培养箱(天津泰斯特仪器有限公司)；LRH-250-MS霉菌培养箱(韶关泰宏医疗器械有限公司)；DF3-3红外线高温干燥箱(北京兴争仪器设备厂)；LDZX立式压力蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械厂)。
1.2 菌种
大肠埃希菌(Escherichia coli)[CMCC(B)44102]、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[CMCC(B)63501]、金黄色葡萄球菌(Staphy lococcus aureus)[CMCC(B)26003]、白色念珠菌(Candida albicans)[CMCC(F)98001]、黑曲霉(Aspergillus niger)[CMCC(F)98003]均购于中国药品生物制品检定所。
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1.3 培养基及试药
营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、营养肉汤、改良马丁、改良马丁琼脂、胆盐乳糖、pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液(批号分别为131218、1312192、131016、1309122、120113、140110、140124)均购自中国药品生物制品检定所。
1.4 样品
呋柳擦剂(北京军区北戴河疗养院，批号：20120917)、复方大承气口服液(解放军第261医院，批号：121022)、复方土荆皮酊(解放军白求恩国际和平医院，批号：20120524)、防风解毒口服液(解放军第261医院，批号：121105)。
2 方法
按照《中国药典》2010 年版一部[4]附录XⅢ C 微生物限度检查法进行验证试验。
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2.1 菌液的制备
(1)取经37℃培养18～24h的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的营养肉汤培养物1mL， 用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
(2)取经25～28℃培养18～24h的白色念珠菌的改良马丁液体培养物1mL，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1mL含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。
(3)取经25～28℃培养5～7d的黑曲霉改良马丁琼脂斜面培养物，加入3～5mL 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱，吸出孢子悬液，用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释制成每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，备用。, 百拇医药(杨静 李晓翠 徐轶飞)