siRNA抑制PTTG1表达对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭性的影响(2)
1.2.4MTT检测PTTG1 siRNA对胶质瘤细胞增殖能力影响将细胞接种于96孔细胞培养板中，每孔中细胞数为3×103个，每孔加入100μL培养基，每种细胞重复5个孔，同时设空白对照组(仅加培养基，不加细胞)，37℃培养，分别于培养后24、48、72h检测各孔吸光度值(OD值)，在检测前每孔加入20μL的MTT继续培养4h后弃培养基，加入二甲基亚砜(DMSO)150μL，室温避光孵育10min，用酶标仪570nm测定各孔吸光度值(OD值)，绘制生长曲线。细胞生长抑制率(%)=(对照组OD值一实验组OD值/对照组OD值)×100%。
1.2.5细胞划痕实验实验分为两组，实验组：转染PTTG1 siRNA干扰质粒组，收集2mL转染PTTG1 siRNA干扰质粒的细胞悬液接种于6孔板，待细胞生长至单层汇合，用移液器枪头在培养板底部呈“一”划痕，用PBS清洗，更换含1%胎牛血清DMEM培养液分别于划痕后0、18和36h用显微镜观察并照相，记录最初划痕区及不同迁移时间划痕的距离。对照组：转染PTTG1非干扰质粒组起始质粒为PTTG1非干扰质粒，其他步骤同上。
1.2.6Transwell小室迁移实验 本实验分为两组，实验组：转染mGl siRNA干扰质粒组，对照组：转染PTrGl非干扰质粒组。将聚碳酸滤膜(8μm)粘附于Transwell小室上方后，用无血清培养基稀释Matrigel胶(1：3)，加至Transwell上室 ......
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