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编号:12783295
siRNA抑制PTTG1表达对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭性的影响(1)
http://www.100md.com 2015年11月1日 中国医药科学 2015年第21期
siRNA抑制PTTG1表达对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭性的影响,垂体肿瘤转化基因,RNA干扰
     【摘要】目的构建针对人脑胶质瘤细胞系的高效沉默PTTG1的RNAi载体;探讨PTTFG1 siRNA干扰质粒对人脑胶质瘤细胞系U373增殖、侵袭性的影响。方法设计三对PTTG1基因干扰序列,合成能够特异干扰PTTG1的siRNA,然后将其与pGenesil2载体连接,构建pGenesil2-PTTG1 siRNA干扰载体,在脂质体作用下将PTFG1 siRNA质粒转染至胶质瘤U373细胞后,用RT-PCR和Western blot方法检测PTTG1 mRNA及蛋白表达水平的变化,通过细胞增殖实验、划痕实验和Transwell小室实验检测PTTG1对胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果在胶质瘤U373细胞转染3个不同的siRNA片段干扰PTTG1的表达,RT-PCR检测结果显示,PTFG1 siRNA1干扰质粒对PTFG1表达的抑制作用最明显[(0.47±0.12)vs(1.00±0.15),P<0.01]。转染PTFGl siRNA质粒的胶质瘤细胞U373在48h和72h细胞增殖能力均显著低于对照组 ......
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