补肾活血方调节miRNA—140—5p表达干预人原代软骨细胞退变的研究(1)
【摘 要】目的：研究补肾活血方含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)刺激的人原代软骨细胞miRNA-140及其靶基因表达的影响。方法：通过采用生理盐水和补肾活血方分别灌胃雌性SD大鼠制备空白血清和含药血清。将人软骨细胞种植于6孔板并且分为3组。空白对照组和模型对照组细胞培养的血清采用大鼠空白血清，含药血清组细胞培养的血清采用大鼠含药血清。另外，模型对照组和含药血清组细胞加入10 ng·mL-1 IL-1β。以上各组细胞设3个复孔，继续培养细胞至IL-1β刺激后24 h收集各组细胞提取总RNA。采用RT-qPCR检测软骨细胞miRNA-140-5p以及聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMTS-5)、胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP5)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达。结果：与空白对照组比较，模型对照组软骨细胞miRNA-140-5p表达和IGFBP5 mRNA表达明显降低(P < 0.05)，ADAMTS-5和MMP-13mRNA表达明显升高(P < 0.05)；与模型对照组比较 ......
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