第 2 7卷 第 4期

    2 0 0 8年 8月

    安 徽 中 医 学 院 学 报

    J OURNAL OF ANHUI TCM COLLEGE

    VoI I 2 7 No .4

    Au g.2 0 08

    穴位埋线对哮喘豚鼠气道病理

    形态学改变和 TGF - ~ 1的影响

    付明举 ， 赖火特 ， 唐纯志 ， 杨君军 ， 赖新生

    ( 广东省深圳市第二人 民医院， 广东 深圳 5 1 8 0 3 5 )

    摘要： 目的： 观察穴位埋线对哮喘豚鼠模型病理形态学改变和支气管肺组织 T GF - ~ 蛋白表达

    的影响。方法： 健康 FMMU豚鼠 3 2只 ， 雌雄各半 ， 随机分为 4组 ： 空白组， 模型组， 地塞米松 组和

    穴位埋线组。处理结束后 ， 取病理切片经苏木精一 伊 红染色后在光镜 下观察气道病理结构的改变，并采用免疫组织化学法检 测支气管肺组织转化生长因子一 p ( TGF - ~ ) 蛋 白表达。结果 ： 模型纽豚鼠

    小气道 中W_ A/ P 。 、 平滑肌面积/ Pi 。 、 支气管壁厚度 d/ Pi均较 空白组 以及 穴位埋线组和地塞米松

    组显著增加 ( P
    及穴位埋线组和地塞米松组( P
    表达 ， 抑制哮喘豚鼠的嗜酸粒细胞性炎症 ， 减轻炎症对气道壁 的损伤 ， 达到干预气道重构的效果。

    关键词： 哮喘； 气道重构； 气道炎症； 细胞 因子； 穴位埋线

    中图分类号： R5 6 2 . 2 +5 ； R 2 4 4 . 8 文献标识码： A 文章编号 ： 1 0 0 0 - -2 2 1 9 ( 2 0 0 8 ) 0 4 - -0 0 2 9 —0 5

    支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞( E OS ) 、 肥大细

    胞( Mc ) 、 T淋巴细胞等多种炎性细胞参与的气道

    慢性过敏反应炎症性疾病 ( a l l e r g i c a i r wa y i n f l a m—

    ma r i o n ，AAI ) ， 属于 中医“ 哮证” 、 “ 喘证” 范畴。 目

    前全球约有 3亿患者， 我国约有 2千万哮喘患者。

    近 2 O年来 ， 许多国家和地 区哮喘的患病率和病死率

    均呈逐渐上升趋势 。世界各 国都把哮喘作为一个重

    点课题来研究 。

    本研究采用支气管肺组织病理镜检以及采用免

    疫组织化 学法检 测支气 管肺 组织 T GF - ~ 蛋 白表

    达， 观察穴位埋线对哮喘豚鼠模型气道病理形态学

    改变和支气管肺组织 TGF - ~ 蛋 白表达的影响。

    1 材料

    1 . 1 实验动物及分组 健康 F MMU豚 鼠3 2只，雌雄各半 ， 体质量 2 5 0 ～3 0 0 g ， 普通级动物， 南 方医

    科大学实验动物研究中心提供， 编号 0 0 2 9 3 3 5 。将

    F MMU豚 鼠 3 2只随机分为空白组 、 模型组、 地塞米

    松组和穴位埋线组， 每组 8只， 每组 雌雄各半 ， 并将

    雌雄分盒饲养。实验在广州中医药大学动物实验中

    心( 动物实验设施使用证明编号 ： 0 0 2 3 2 0 0 ) 进行。

    基金项目： 广东省中医药管理局项 目( 1 0 5 0 1 4 7 )

    作者简介： 付明举( 1 9 6 3 一) ， 女 ， 主任医师

    通讯作者 ： 赖新生， T e l ：0 2 0 - 3 6 5 8 5 5 7 8 E - ma i l ： l a i 1 0 2 3 @1 6 3 . e o m

    1 广州医学院港湾医院

    2 广州中医药大学

    1 . 2 主要仪器和试剂 粤华牌 wH一 2 0 0 0型超声

    雾化喷雾器 ， 由粤华 医疗器械厂有 限公司生产 ； S a r —

    t o r i u s电子天平 B S l l 0 S， 德国产 ； Le i c a DMRA显微

    镜； D C 2 0 0扫描仪； L e i c a Qwi n 5 5 0图像分析系统；

    光学显微镜 ( Ol y mp u s B X5 0生物组织显微镜 ) ； 徕

    卡 2 2 4 5型半 自动石蜡切片机 ； 徕卡 E G1 】 4 O型石蜡

    包埋机 ； 徕卡 T P 1 0 2 0型生物组织脱水机( 德 国) ； 徕

    卡 RM2 2 5 5型全 自动石蜡切片机( 德国) ； 徕卡 5 O 1 O

    型石蜡切片染 色机 ( 德 国) ； 恒温水浴箱( 型号 7 O 0 ，中国) ； 摊烘片机( 型号 Z MN2 0 0 ， 中国) 。

    卵白蛋 白 ( O VA， Gr a d e 1 I) ， 由美 国 S i g ma公

    司生产； “ 4 - 0 ” 号医用羊肠线 ， 上海浦东金环医疗用

    品有限公司生产 ； 水溶性封片剂 ( 批号 0 9 5 0 7 2 ， 中国

    广州晶美公司生产) ， TGF - ~ 羊抗兔免疫组化试剂

    盒( 批号 B A0 4 1 9 ， 中国武汉波士德) 等 。

    2 方法

    2 . 1 模型复制 健康 F MMU豚鼠， 观： 察 1 周， 无

    异常情况出现则开始复制模型。模型组 、 地塞米松

    组 、 穴位埋线组模型复制方法均相 同： 第 1天， 每只

    豚鼠采用卵蛋 白致敏 ， 先腹腔注射 1 0 0 g / L卵蛋白一

    9 . 0 g / L氯化钠注射液( NS ) 1 ml ， 两周后隔天用 1 O

    g / L卵蛋白一 NS超声喷雾， 每次 1 mi n ， 至哮喘发作

    ( 出现烦躁、 呛咳、 抓鼻 、 打喷嚏 ， 呼吸频率加快 、 幅度

    加大， 腹式呼吸明显和点头状呼吸 ， 严重者呼吸减慢

    或节律不整， 轻度紫绀， 行动迟滞或俯伏不动， 反应

    迟钝等症状) 。隔天激发 1 次 ， 连续 6 周 。在实验过

    29

    维普资讯 http://www.cqvip.com 程 中因哮喘激发过度等 因素造成 豚鼠死亡 8只， 最

    后每组剩下 6只。

    2 . 2 治疗方法

    2 . 2 . 1 穴位埋线具体操作方法 ： 先将羊肠线置于无

    菌弯盘中， 倒入 NS冲洗 ， 并剪成 0 . 2 ～0 。 4 c I n小段

    若干。将肠线从无菌 8号注射针针尖穿入， 再将预

    先剪去针尖的毫针从注射针针尾部穿入 ， 肠线穿入

    注射针后保持水平， 以免滑落。埋线时每穴 l 针 ， 定

    位取穴 ， 无菌操作 皮肤 ， 持针刺入穴位 ， 到达预定深

    度 ， 先稍稍后退针， 然后将右手拇指抵住毫针针尾作

    注射状 ， 缓慢将肠线挤入穴内， 感觉注射针 内有突然

    空虚感时即可出针 ， 并确认肠线已埋入皮下或肌层 ，无菌棉签按压针孔处止血。

    2 . 2 。 2 各组治疗方法 ： 空白组 ： 不作任何处理。模

    型组 ： 模型复制后不给予任何治疗。地塞米松组 ： 于

    每次用 1 0 g / L卵蛋白一 NS超声喷雾前 3 0 mi n腹腔

    注射地塞米松 1 . 5 mg / k g 。穴位埋线组 ： 模 型豚鼠

    哮喘发作后第 2天进行穴位埋线治疗 ， 每周 1次， 在

    用 1 0 g / L卵蛋 白一 NS超声喷雾前 3 0 mi n ......