雏鸡脑软化症细胞免疫功能变化的研究.pdf
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· 1 0 0 · 疾病防治 中国畜牧兽 医 2 0 0 7年第 3 4卷 第 2期
雏鸡脑软化症细胞免疫功能变化的研究
王奔 , 张宏玲, 李艳飞
( 东北农业大学动物 医学 院 , 哈尔滨 1 5 0 0 3 0 )
摘要 : 以 1日龄海兰蛋鸡为试验动物 , 用低 VE水平且添加鱼油 日粮饲喂雏鸡 , 复 制脑软化 症动物模 型 , 研究 脑软化 症雏
鸡血液 白细胞数 ( WB C) 、 T淋 巴细胞总数 、 T淋 巴细胞 酸性 非特异性 醋 酸萘脂酶 ( ANAE ) 及血清 白介 素一 1 8和 白介素一 2含
量的变化。结果表明, 患雏的 WB C数、 A NAE T淋巴细胞总数、 血清白介素含量均明显低于健康对照组雏鸡。结果说明,VE缺 乏对雏鸡细胞 免疫 功能有明显的抑制作用。
关键词: 雏鸡 ; 脑软 化症 ; 细胞免疫功能
中图分类号 : $ 8 5 8 . 3 1 文献标识码 : B 文章编 号 : 1 6 7 1 — 7 2 3 6 ( 2 0 0 7 ) 0 2 — 0 1 0 0 — 0 2
营养性脑软化症是由于饲料中 VE缺乏所致的
一
种群发性营养代谢病, 该病主要侵害2 ~8周龄生
长较快的雏鸡( P a p p e n h e i me r 等, 1 9 3 1 ) 。VE是动
物必需的营养因子, 对动物的生长发育、 繁殖及免疫
功能有着重 要作用。近年来 的研究结 果表 明, VE
能增强动物机体 的免疫力 , 但 VE缺乏对雏 鸡细胞
免疫功能影响的研究未见有报道 。本试验用人工复
制的 VE缺乏症雏鸡模型 , 对其细胞免疫 功能进行
探讨, 可为早期诊断、 治疗和预防该病提供重要的理
论依据 。
1 试验材料
1 . 1 试验动物及分组 选用 1日龄海兰 白蛋用鸡
1 0 0只 , 随机分为健康对照组 ( C组) 和低 VE组 ( L
组) 。C组鸡 , 饲喂营养全 面的配合 日粮 ( 经测定其
V E含量为 3 1 mg / k g ) ; L组鸡 , 不添加 V E, 加 4
鱼油( 经测定其 VE含量为 5 mg / k g ) 。试验期为 5
周 , 2组鸡在相同条件下进行饲养管理 , 并定时观察
试验鸡的临床症状 。
1 . 2 样品采集 取脑软化症雏鸡和健康对照雏鸡 ,心脏采血 , 将采集 的血样 分成 2份, 1份用肝 素抗
凝, 另 1份不抗凝, 并将制备的血清置一2 0 ℃冰箱保
存备用。
2 试验方法
2 . 1 外周血液细胞数量的检测
收稿 日期 : 2 0 0 6 - 0 6 — 1 5
作者简介: 王奔 ( 1 9 8 O 一) , 男, 黑龙江人, 硕士生, 主要从事动物
营养代谢病的研究。
通讯作者 : 李 艳飞 。T e l : 0 4 5 1 - 8 8 2 5 8 2 9 0 ;E - ma i l : y a n f e i l i 2 0 0 @
y a h o o . c o m. c n
基金项目: 国家 自然基金项 目( 3 0 4 7 1 2 7 9 ) ; 黑龙江省博士后科研
启动金 ( L B H— Qo 5 o 2 4 ) 。
2 . 1 . 1 白细胞数量测定 按常规方法计算不同时
期 2组雏鸡外周血液白细胞数, 计算白细胞绝对数
量( 细胞数 ×1 0 / mm。 ) 。
2 . 1 . 2 淋 巴细胞计数 翼静脉针刺取血并推制血
膜片, 迅速吹干, 无水 甲醇 固定 1 mi n , 用姬姆 萨染
色液染色, 水洗干燥 后常规分类计数。根据淋巴细
胞百分率 ( ) , 计数淋 巴细胞绝对数量( 淋巴细胞数
×1 0 一 。 / r am。 ) 。
2 . 1 . 3 T淋 巴细胞 ANAE 的测定 采用酸性 0 t 一
醋酸萘脂酶染色法进行 。翼静脉针刺取血并推制血
膜片, 迅速吹干编号 , 浸入新鲜配置的孵育液 中, 置
3 7 ℃温箱 中恒 温孵 育 5 h 。孵 育后血 膜 片充分水
洗 , 继而用 1 孔雀绿溶液重复染色 1 mi n , 水洗干
燥备检。于血膜头 、 体 、 尾 3部分共检查 2 0 0个淋巴
细胞 , 计算淋巴细胞阳性率。
酸性非特异性 a 一 醋酸萘脂酶( ANAE ) T淋 巴
细胞总数 一淋 巴细胞数/mm。 ×ANAE T淋 巴细
胞 阳性率( )
2 . 2 白细胞介素一 1 p ( I L 一 1 p ) 和 I L 一 2含量检测 用
放射免疫分析方法 。
3 试验结果
L组 WB C数 、 淋 巴细胞 总数 、 ANAE T淋 巴
细胞总数和血清 中 I L 一 1 、 I L 一 2含量都低于 C组 ......
雏鸡脑软化症细胞免疫功能变化的研究
王奔 , 张宏玲, 李艳飞
( 东北农业大学动物 医学 院 , 哈尔滨 1 5 0 0 3 0 )
摘要 : 以 1日龄海兰蛋鸡为试验动物 , 用低 VE水平且添加鱼油 日粮饲喂雏鸡 , 复 制脑软化 症动物模 型 , 研究 脑软化 症雏
鸡血液 白细胞数 ( WB C) 、 T淋 巴细胞总数 、 T淋 巴细胞 酸性 非特异性 醋 酸萘脂酶 ( ANAE ) 及血清 白介 素一 1 8和 白介素一 2含
量的变化。结果表明, 患雏的 WB C数、 A NAE T淋巴细胞总数、 血清白介素含量均明显低于健康对照组雏鸡。结果说明,VE缺 乏对雏鸡细胞 免疫 功能有明显的抑制作用。
关键词: 雏鸡 ; 脑软 化症 ; 细胞免疫功能
中图分类号 : $ 8 5 8 . 3 1 文献标识码 : B 文章编 号 : 1 6 7 1 — 7 2 3 6 ( 2 0 0 7 ) 0 2 — 0 1 0 0 — 0 2
营养性脑软化症是由于饲料中 VE缺乏所致的
一
种群发性营养代谢病, 该病主要侵害2 ~8周龄生
长较快的雏鸡( P a p p e n h e i me r 等, 1 9 3 1 ) 。VE是动
物必需的营养因子, 对动物的生长发育、 繁殖及免疫
功能有着重 要作用。近年来 的研究结 果表 明, VE
能增强动物机体 的免疫力 , 但 VE缺乏对雏 鸡细胞
免疫功能影响的研究未见有报道 。本试验用人工复
制的 VE缺乏症雏鸡模型 , 对其细胞免疫 功能进行
探讨, 可为早期诊断、 治疗和预防该病提供重要的理
论依据 。
1 试验材料
1 . 1 试验动物及分组 选用 1日龄海兰 白蛋用鸡
1 0 0只 , 随机分为健康对照组 ( C组) 和低 VE组 ( L
组) 。C组鸡 , 饲喂营养全 面的配合 日粮 ( 经测定其
V E含量为 3 1 mg / k g ) ; L组鸡 , 不添加 V E, 加 4
鱼油( 经测定其 VE含量为 5 mg / k g ) 。试验期为 5
周 , 2组鸡在相同条件下进行饲养管理 , 并定时观察
试验鸡的临床症状 。
1 . 2 样品采集 取脑软化症雏鸡和健康对照雏鸡 ,心脏采血 , 将采集 的血样 分成 2份, 1份用肝 素抗
凝, 另 1份不抗凝, 并将制备的血清置一2 0 ℃冰箱保
存备用。
2 试验方法
2 . 1 外周血液细胞数量的检测
收稿 日期 : 2 0 0 6 - 0 6 — 1 5
作者简介: 王奔 ( 1 9 8 O 一) , 男, 黑龙江人, 硕士生, 主要从事动物
营养代谢病的研究。
通讯作者 : 李 艳飞 。T e l : 0 4 5 1 - 8 8 2 5 8 2 9 0 ;E - ma i l : y a n f e i l i 2 0 0 @
y a h o o . c o m. c n
基金项目: 国家 自然基金项 目( 3 0 4 7 1 2 7 9 ) ; 黑龙江省博士后科研
启动金 ( L B H— Qo 5 o 2 4 ) 。
2 . 1 . 1 白细胞数量测定 按常规方法计算不同时
期 2组雏鸡外周血液白细胞数, 计算白细胞绝对数
量( 细胞数 ×1 0 / mm。 ) 。
2 . 1 . 2 淋 巴细胞计数 翼静脉针刺取血并推制血
膜片, 迅速吹干, 无水 甲醇 固定 1 mi n , 用姬姆 萨染
色液染色, 水洗干燥 后常规分类计数。根据淋巴细
胞百分率 ( ) , 计数淋 巴细胞绝对数量( 淋巴细胞数
×1 0 一 。 / r am。 ) 。
2 . 1 . 3 T淋 巴细胞 ANAE 的测定 采用酸性 0 t 一
醋酸萘脂酶染色法进行 。翼静脉针刺取血并推制血
膜片, 迅速吹干编号 , 浸入新鲜配置的孵育液 中, 置
3 7 ℃温箱 中恒 温孵 育 5 h 。孵 育后血 膜 片充分水
洗 , 继而用 1 孔雀绿溶液重复染色 1 mi n , 水洗干
燥备检。于血膜头 、 体 、 尾 3部分共检查 2 0 0个淋巴
细胞 , 计算淋巴细胞阳性率。
酸性非特异性 a 一 醋酸萘脂酶( ANAE ) T淋 巴
细胞总数 一淋 巴细胞数/mm。 ×ANAE T淋 巴细
胞 阳性率( )
2 . 2 白细胞介素一 1 p ( I L 一 1 p ) 和 I L 一 2含量检测 用
放射免疫分析方法 。
3 试验结果
L组 WB C数 、 淋 巴细胞 总数 、 ANAE T淋 巴
细胞总数和血清 中 I L 一 1 、 I L 一 2含量都低于 C组 ......
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